產品名稱：CellArtis Y30021 人 iPS細胞基因編輯和單細胞克隆系統

產品貨號：CellArtis Y30021

產(chan)品品牌(pai)：TAKARA/ CellArtis

英文名稱(cheng)：Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS™ Culture Media Kit

人 iPS細胞基因編輯和單細胞克隆系統 現貨供應，歡迎咨詢

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從開始到結束：人iPS細胞基因編輯和單細胞克隆系統

人(ren)(ren)誘導多(duo)能干細胞（Human induced pluripotent stem cells，hiPSCs)是一個功能強(qiang)大的(de)研(yan)究(jiu)工(gong)具和(he)(he)疾病(bing)模型(xing)(xing)，因(yin)為(wei)其具備增(zeng)殖、自我更(geng)新、分化(hua)為(wei)多(duo)種細胞類(lei)型(xing)(xing)的(de)能力。此外，人(ren)(ren)iPS細胞還(huan)可以(yi)再現細胞來源個體的(de)疾病(bing)表型(xing)(xing)和(he)(he)基(ji)(ji)(ji)因(yin)型(xing)(xing)。將人(ren)(ren)iPS細胞結合基(ji)(ji)(ji)于CRISPR/Cas9的(de)基(ji)(ji)(ji)因(yin)編(bian)輯技術(shu)，可以(yi)在(zai)同基(ji)(ji)(ji)因(yin)的(de)細胞系中研(yan)究(jiu)特定基(ji)(ji)(ji)因(yin)改變引起的(de)功能影響，因(yin)為(wei)基(ji)(ji)(ji)因(yin)編(bian)輯過的(de)人(ren)(ren)iPS細胞能提供可再生(sheng)的(de)、無(wu)遺傳變異(yi)的(de)患病(bing)細胞和(he)(he)健康細胞資源。

CRISPR/Cas9系(xi)統已經成為(wei)一(yi)(yi)個(ge)強大(da)的(de)基(ji)因(yin)(yin)編(bian)(bian)輯工具，因(yin)(yin)為(wei)其(qi)高的(de)靶向特異性，編(bian)(bian)輯效(xiao)率和易用(yong)性。該技(ji)術的(de)強大(da)主要源于它的(de)簡單，因(yin)(yin)為(wei)全(quan)部(bu)只需要一(yi)(yi)個(ge)Cas9核酸酶(mei)結合一(yi)(yi)個(ge)單鏈向導RNA（single guide RNA，sgRNA) 就可(ke)以(yi)決(jue)定靶向特異性（Jinek et al. 2012)。這種(zhong)(zhong)RNA編(bian)(bian)程的(de)（RNA-programmable）方(fang)法利用(yong)了非同源末端連接(non-homologous end joining，NHEJ) DNA修(xiu)復途徑的(de)易錯(cuo)特性，進而產(chan)生基(ji)因(yin)(yin)敲除(通過(guo)插入(ru)/刪除)。這種(zhong)(zhong)方(fang)法也可(ke)以(yi)通過(guo)同源重組（homology-directed repair，HDR)途徑被用(yong)于基(ji)因(yin)(yin)敲入(ru)。

CRISPR/Cas9系(xi)統的(de)組件(jian)可以通過多(duo)種方法成功導入(ru)至靶細胞(bao)，包括基于載體的(de)表達(da)系(xi)統，RNA轉染, 導入(ru)Cas9/sgRNA核糖核蛋白（ribonucleoprotein，RNP)復合物(Sander and Joung 2014)等。與基于載體的(de)方法相比，直接(jie)導入(ru)Cas9/sgRNA RNPs提供了一種快速轉入(ru)基因編(bian)輯實驗(yan)的(de)方法，同時脫(tuo)靶效應的(de)可能性更小（Kim et al. 2014)。

一(yi)旦Cas9/sgRNA RNP復合物被導入，為了(le)分離和(he)(he)(he)(he)篩選(xuan)感興趣(qu)的(de)(de)(de)基(ji)因(yin)型，單(dan)細(xi)(xi)胞(bao)必須被分離并擴增(zeng)為克隆(long)細(xi)(xi)胞(bao)系。傳(chuan)統上,從基(ji)因(yin)編輯(ji)的(de)(de)(de)hiPS細(xi)(xi)胞(bao)建(jian)立一(yi)個克隆(long)群是低(di)效(xiao)的(de)(de)(de)、具(ju)有挑戰性(xing)的(de)(de)(de)和(he)(he)(he)(he)耗時的(de)(de)(de)，因(yin)為hiPS 細(xi)(xi)胞(bao)是以集(ji)落生長和(he)(he)(he)(he)傳(chuan)代的(de)(de)(de)。通常，這會(hui)導致細(xi)(xi)胞(bao)死亡和(he)(he)(he)(he)提(ti)前分化。然而，Cellartis單(dan)細(xi)(xi)胞(bao)克隆(long)系統包含一(yi)個成分確定的(de)(de)(de)培養系統(由基(ji)礎培養基(ji)，包被劑，和(he)(he)(he)(he)添加(jia)劑組(zu)成)，用于有效(xiao)形成單(dan)細(xi)(xi)胞(bao)克隆(long)和(he)(he)(he)(he)擴增(zeng)基(ji)因(yin)編輯(ji)后(hou)的(de)(de)(de)hiPSC克隆(long)。DEF-CS culture system (Asplund et al. 2016)是一(yi)個基(ji)于單(dan)層培養的(de)(de)(de)系統，規避(bi)了(le)集(ji)落狀培養帶來的(de)(de)(de)挑戰，允(yun)許單(dan)細(xi)(xi)胞(bao)傳(chuan)代和(he)(he)(he)(he)促進接(jie)種的(de)(de)(de)單(dan)細(xi)(xi)胞(bao)存活(huo)和(he)(he)(he)(he)后(hou)續擴增(zeng)。

Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS Culture Media Kit (Code No. Y30021) 是一個完整的(de)(de)，在無飼養層(ceng)和成分(fen)確定(ding)條(tiao)件下，用于(yu)hiPSCs有效(xiao)擴增和擴大生產(chan)的(de)(de)系(xi)統。試劑盒包含了(le)從接種單(dan)細胞至(zhi)96孔板(ban)(ban)到擴增至(zhi)48孔板(ban)(ban)過程中所(suo)有必(bi)要(yao)的(de)(de)試劑。單(dan)細胞克隆(long)擴增后，hiPSCs可以使用Cellartis DEF-CS 500 Culture System (Code No. Y30010)繼(ji)續培養。

產品特點：

1.成分確定的，無血清，無飼養層培養

2.All-In-One型: 培(pei)養基(ji)+添加(jia)劑+包被劑維持良好的多能性狀態(tai)，背(bei)景分化低

3.細胞非集(ji)落狀均勻生長，輕(qing)松單細胞傳代(dai)

4.單個干細胞基因操作實驗的理想選擇(ze)

產品名稱：人 iPS細胞基因編輯和單細胞克隆系統

產品貨號：CellArtis Y30021

產品品牌(pai)：TAKARA/ CellArtis

英文名稱：Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS™ Culture Media Kit

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