關于(yu)支原體培養的相關知(zhi)識

支原體定(ding)義：

  支原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)(ti)（mycoplasma）是一類沒有細胞壁、高度多形(xing)性、能通過濾菌器、可用人工培(pei)養基培(pei)養增殖的最小原(yuan)(yuan)核細胞型微生物(wu)。由于(yu)能形(xing)成絲狀與(yu)分枝(zhi)形(xing)狀，故稱為支原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)(ti)。支原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)(ti)廣泛存在(zai)于(yu)人和動物(wu)體(ti)(ti)(ti)(ti)內，大多不致(zhi)病，對(dui)人致(zhi)病的支原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)(ti)主要有肺炎支原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)(ti)、溶脲(niao)脲(niao)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)(ti)、人型支原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)(ti)、生殖器支原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)(ti)等。

支原體結構：

  支(zhi)原體的大(da)小為0.1～0.3um，可通過濾菌(jun)器，常(chang)給細(xi)胞培(pei)養(yang)工作帶來污染(ran)的麻煩。菌(jun)落小（直徑0.1-1.0mm），在固體培(pei)養(yang)基表面呈(cheng)*的"油煎(jian)蛋"狀。無細(xi)胞壁，不能(neng)(neng)維持(chi)固定(ding)的形態(tai)而(er)呈(cheng)現多(duo)形性，對(dui)滲透壓敏感(gan)，對(dui)抑(yi)制(zhi)細(xi)胞壁合成的抗生素不敏感(gan)。革(ge)蘭氏染(ran)色(se)不易著色(se)，故常(chang)用Giemsa染(ran)色(se)法將其(qi)染(ran)成淡紫色(se)。細(xi)胞膜中(zhong)膽固醇(chun)含量較多(duo)，約占36%，對(dui)保持(chi)細(xi)胞膜的完整性具有(you)一(yi)定(ding)作用。細(xi)胞膜含甾醇(chun)，比其(qi)他原核生物的膜更堅韌。凡能(neng)(neng)作用于膽固醇(chun)的物質均可引起支(zhi)原體膜的破(po)壞(huai)而(er)使支(zhi)原體死亡。

   支原(yuan)體基因組為一環(huan)狀以雙鏈DNA，分(fen)(fen)子(zi)量小（僅有大腸桿菌的五分(fen)(fen)之一），合成(cheng)與代謝很有限(xian)。

   肺炎(yan)支原體的一端有一種特殊的末端結(jie)構(gou)（terminal structure），能使支原體粘(zhan)附于呼(hu)吸道粘(zhan)膜上皮細胞表面，與致病性有關。

支原(yuan)體(ti)分類(lei)：

  一般能(neng)(neng)分解葡(pu)萄(tao)(tao)糖的(de)支(zhi)原體則不(bu)能(neng)(neng)利(li)用(yong)(yong)精氨(an)酸，能(neng)(neng)利(li)用(yong)(yong)精氨(an)酸的(de)則不(bu)能(neng)(neng)分解葡(pu)萄(tao)(tao)糖，據此(ci)可將(jiang)支(zhi)原體分為(wei)兩類。解脲支(zhi)原體不(bu)能(neng)(neng)利(li)用(yong)(yong)葡(pu)萄(tao)(tao)糖或精氨(an)酸，但可利(li)用(yong)(yong)尿素(su)作能(neng)(neng)源。

   各(ge)種支原體都(dou)有(you)(you)特異(yi)的(de)表面抗原結(jie)構，很(hen)少有(you)(you)交叉(cha)反應，具有(you)(you)型特異(yi)性。應用(yong)生長抑制試(shi)驗（Growth inhibition test,GIT）、代(dai)謝抑制試(shi)驗（Metabolic inhibition test,MIT）等可鑒定支原抗原，進行分型。

   它(ta)廣泛(fan)分(fen)布于自然界，有80余種(zhong)。與人類有關(guan)的支(zhi)原(yuan)體有肺(fei)炎支(zhi)原(yuan)體（M-pneumonie，Mp）、人型支(zhi)原(yuan)體（UU 分(fen)解尿素支(zhi)原(yuan)體）和生殖器(qi)支(zhi)原(yuan)體（M.genitalium，MG）等(deng)。

   肺炎支(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)引(yin)起(qi)肺炎。現已從人類(lei)泌尿生(sheng)(sheng)殖(zhi)(zhi)道(dao)(dao)分離出(chu)來7種支(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)，其中分離率較高而與泌尿生(sheng)(sheng)殖(zhi)(zhi)道(dao)(dao)疾病有關，是(shi)解脲(niao)支(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)，其次(ci)是(shi)人型(xing)支(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)。人型(xing)支(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)（M.humenis，MH）、解脲(niao)支(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)（Ureaplasma urealyticum，UU）和生(sheng)(sheng)殖(zhi)(zhi)器支(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)（M.genitalium，MG）都會引(yin)起(qi)泌尿生(sheng)(sheng)殖(zhi)(zhi)道(dao)(dao)感染。

    自然(ran)界中廣泛存在絕大多數生長(chang)需膽(dan)固醇，在遺傳(chuan)上與細菌(jun)無(wu)關(guan)，且無(wu)論(lun)在什么條件下也不能變成(cheng)細菌(jun)菌(jun)落較(jiao)小，0.1～0.3mm。

培養條(tiao)件：

  營(ying)養(yang)要求比一般細菌高(gao)，除(chu)基礎營(ying)養(yang)物(wu)質外還需加入10～20%人或動(dong)物(wu)血清以提供支原體(ti)(ti)所(suo)需的(de)膽固醇。最(zui)適pH7.8～8.0之(zhi)間，低于7.0則死亡(wang)，但(dan)解脲支原體(ti)(ti)最(zui)適pH6.0～6.5。

   大多數兼(jian)性厭氧，有些菌(jun)株在(zai)初分離(li)時加(jia)入5%CO2生長更好。生長緩慢，在(zai)瓊脂含量較少的固體培養(yang)基上(shang)孵育2～3天出現典型的“荷包蛋樣(yang)"菌(jun)落(luo)：圓(yuan)形（直徑10～16um），核心部分較厚，向下長入培養(yang)基，周邊為一層薄的透明(ming)顆粒區。此(ci)外(wai)，支原體還能(neng)在(zai)雞胚(pei)絨毛(mao)尿囊膜(mo)或培養(yang)細胞中生長。