產品名稱：STEMCELL Lymphoprep密度梯度分離液

產品貨(huo)號：07851

英文名稱：Lymphoprep Density gradient medium for the isolation of mononuclear cells

產品規格(ge)：250ml/500ml

產品(pin)介紹：

Lymphoprep™ 是(shi)一種密(mi)度梯度培(pei)養基(ji)，推薦用于利(li)用細(xi)胞(bao)(bao)密(mi)度的(de)差異從外周血、臍帶血和(he)骨髓中分離(li)單核細(xi)胞(bao)(bao)。粒細(xi)胞(bao)(bao)和(he)紅細(xi)胞(bao)(bao)的(de)密(mi)度高(gao)于單核細(xi)胞(bao)(bao)，因此在離(li)心(xin)過程中會通過 Lymphoprep™ 層沉(chen)淀。Lymphoprep™ 可替代 Ficoll-Paque™，無需更改您現(xian)有的(de)方案，并且與 SepMate™ 和(he) RosetteSep™ *兼容。

Lymphoprep™ 的密度(du)為 1.077 g/mL。

工作(zuo)原(yuan)理(li)：

PBMC與血液(ye)(ye)中(zhong)的(de)其(qi)他(ta)成(cheng)分(fen)存在(zai)(zai)密(mi)度(du)差(cha)異(yi)，利用密(mi)度(du)在(zai)(zai)1.077±0.001g/ml之間(jian)而且近(jin)于等滲(shen)的(de)LymphoprepTM溶液(ye)(ye)作密(mi)度(du)梯(ti)度(du)離(li)心時，紅(hong)(hong)細(xi)胞和粒細(xi)胞由于密(mi)度(du)大，故沉(chen)于分(fen)離(li)液(ye)(ye)底部。PBMC密(mi)度(du)稍低于分(fen)離(li)液(ye)(ye)，故位于分(fen)離(li)液(ye)(ye)界面(mian)上，獲得(de)PBMC。LymphoprepTM分(fen)離(li)液(ye)(ye)含(han)有多糖（polysacccharide）,多糖能粘附(fu)在(zai)(zai)細(xi)胞表面(mian)，使紅(hong)(hong)細(xi)胞和粒細(xi)胞聚(ju)集下沉(chen)，但(dan)它(ta)對(dui)淋巴(ba)細(xi)胞的(de)活性和紅(hong)(hong)細(xi)胞和粒細(xi)胞進一步分(fen)離(li)有負面(mian)影響。

產品參數：

亞(ya)型  密度(du)梯度(du)介質

細(xi)胞(bao)(bao)類型  單核細(xi)胞(bao)(bao)

物種  人類

樣本來源(yuan)  骨髓、臍帶血(xue)、全血(xue)

應用  細胞(bao)分離

品(pin)牌  淋巴制劑

產品組分：

 泛影酸鈉 (9.1% w/v)

• 多糖 (5.7% w/v)

• 其(qi)他(ta)成分

產品使(shi)用說(shuo)明

第(di)一步

在含(han)有抗凝(ning)劑（EDTA、heparin、或(huo)ACD）的(de)管子內收集血(xue)液，或(huo)者用去(qu)纖維蛋白的(de)血(xue)液。此處抗凝(ning)劑的(de)選擇(ze)取決于得到淋巴細胞以后，后續(xu)實(shi)驗的(de)要(yao)求，一般選取EDTA即可(ke)。

第二(er)步

用等體積的(de)0.9%的(de)NaCl溶液（即生理鹽水(shui)）稀釋(shi)血液。

第三步(bu)

在(zai)12-15ml的離(li)心管內，將6ml稀釋后的血液鋪在(zai)3ml分(fen)離(li)介質Lymphoprep上。

此處鋪層(ceng)可以采用從上面鋪，或從下面鋪兩(liang)種方法。鋪層(ceng)的關鍵是不能讓(rang)血(xue)液(ye)和分離液(ye)混在一起，要界面分層(ceng)清(qing)晰。

第四步

在室溫下——20攝氏(shi)度左右，用水平轉子，800g的離(li)心力，離(li)心20分鐘(zhong)。（如果血液存(cun)放時間超過2小(xiao)時——從(cong)人體抽出算起，離(li)心時間延長為(wei)30分鐘(zhong)）。

第五(wu)步

離心(xin)前和離心(xin)后，離心(xin)管內(nei)液(ye)體分(fen)層如下圖(tu)所示。

離心后，離心管內位(wei)于血液(ye)和分(fen)離液(ye)界面(mian)處的(de)明顯的(de)一(yi)層(ceng)即(ji)為淋巴細胞層(ceng)。

用移(yi)液管(guan)直(zhi)接(jie)吸(xi)取(qu)淋巴細胞層(ceng)，注意，不要去除上(shang)面的血(xue)液層(ceng)，而是直(zhi)接(jie)吸(xi)取(qu)。移(yi)至另一離心管(guan)中。

第六步

用大(da)約2倍體積的(de)(de)0.9%的(de)(de)NaCl溶液（生理鹽水）稀(xi)(xi)釋收集(ji)到的(de)(de)淋(lin)巴細(xi)胞，在250g-300g的(de)(de)離(li)心力(li)下，離(li)心10分鐘，（此處在加上稀(xi)(xi)釋液后(hou)(hou)的(de)(de)體積在15ml離(li)心管內(nei)不(bu)宜超過5-6ml，體積過大(da)，會(hui)降低(di)淋(lin)巴細(xi)胞的(de)(de)產率），收集(ji)沉淀，即得到所需的(de)(de)人外(wai)周血(xue)單個(ge)核細(xi)胞，即可用于后(hou)(hou)續的(de)(de)實驗。

產品訂購信息：

品牌             貨(huo)號                   名(ming)稱                                             規格(ge)

STEMCELL  07851   Lymphoprep密度(du)梯(ti)度(du)分離液         250ml/500ml

產品名稱：STEMCELL Lymphoprep密度梯度分離液

產(chan)品貨號：07851

關于(yu)公(gong)司：

STEMCELL Technologies 為全球從(cong)事干(gan)細胞、免(mian)疫學(xue)、癌癥、再生醫學(xue)和細胞治(zhi)療研究的(de)(de)科(ke)(ke)學(xue)家提(ti)供高質量的(de)(de)細胞培養基、細胞分離技術、儀器(qi)、配套(tao)產(chan)品和教(jiao)育資源。在 STEMCELL，我們(men)(men)致力(li)(li)于通(tong)過(guo)先(xian)進(jin)的(de)(de)知(zhi)識和科(ke)(ke)學(xue)發現，通(tong)過(guo)我們(men)(men)致力(li)(li)于促進(jin) STEM 和生命科(ke)(ke)學(xue)行業(ye)的(de)(de)多樣性(xing)和包容(rong)性(xing)，以及通(tong)過(guo)我們(men)(men)對(dui)可持(chi)續性(xing)、社區和社會責任的(de)(de)投資來改善生活。植根于科(ke)(ke)學(xue)專業(ye)知(zhi)識和嚴謹(jin)性(xing)，我們(men)(men)是(shi)一家科(ke)(ke)學(xue)家幫助科(ke)(ke)學(xue)家的(de)(de)公司，我們(men)(men)深(shen)切(qie)關心讓世界變得更(geng)美好。

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