產品英文名稱：Vero Cell HCP ELISA kit
產品中文名稱(cheng)：Vero 細胞宿主蛋白免疫(yi)檢測試劑盒(he)

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Vero Cell HCP ELISA kit產品介紹：
病(bing)毒疫苗(miao)或(huo)其它治(zhi)療用蛋白在Vero細(xi)胞中(zhong)表達是商業用大量生產(chan)(chan)(chan)(chan)(chan)藥物(wu)(wu)原(yuan)料產(chan)(chan)(chan)(chan)(chan)品的經濟(ji)簡(jian)便(bian)方法(fa)。Vero Cell HCP ELISA試劑盒開發使用了不(bu)同(tong)終端產(chan)(chan)(chan)(chan)(chan)品和(he)中(zhong)試樣品，４種(zhong)不(bu)同(tong)疫苗(miao)產(chan)(chan)(chan)(chan)(chan)品是從疫苗(miao)生產(chan)(chan)(chan)(chan)(chan)商獲(huo)得，包(bao)括全病(bing)毒疫苗(miao)和(he)重(zhong)組蛋白。Vero Cell HCP ELISA使用具(ju)有(you)廣泛反(fan)應性(xing)(xing)，強吸附性(xing)(xing)的多克隆抗(kang)體，可以鑒(jian)定出所有(you)Vero細(xi)胞系中(zhong)高(gao)度(du)保(bao)守的HCP。產(chan)(chan)(chan)(chan)(chan)品靈敏性(xing)(xing)強（zui低檢測濃度(du)達 0.7ng/mL）和(he)具(ju)有(you)高(gao)度(du)特異性(xing)(xing)，可以應用于(yu)任何在Vero細(xi)胞中(zhong)表達的蛋白產(chan)(chan)(chan)(chan)(chan)物(wu)(wu)。

§檢測原理：Vero Cell檢測是一(yi)(yi)個(ge)雙位(wei)點酶聯免疫檢測。樣本(ben)中(zhong)包含的(de)Vero Cell HCPs蛋(dan)白與(yu)標記有(you)抗- Vero Cell抗體的(de)辣根(gen)過氧化物酶同時反(fan)應(ying)(ying)，反(fan)應(ying)(ying)發生在(zai)之前涂(tu)有(you)一(yi)(yi)層吸附性抗- Vero Cell蛋(dan)白抗體的(de)微量滴(di)(di)定(ding)板(ban)(ban)中(zhong)進行。免疫反(fan)構成為夾(jia)層式(shi)結(jie)構：固相(xiang)抗休-HCP-酶標記抗體。反(fan)應(ying)(ying)結(jie)束后(hou)清洗(xi)微量滴(di)(di)定(ding)板(ban)(ban)去除未結(jie)合反(fan)應(ying)(ying)物。添加TMB作 用底物反(fan)應(ying)(ying)。微量滴(di)(di)定(ding)板(ban)(ban)讀數器(qi)上測定(ding)水解物濃(nong)度(du)，水解物濃(nong)度(du)與(yu)Vero Cell HCPs蛋(dan)白濃(nong)度(du)成比(bi)例(li)。用提供的(de)標準(zhun)液(ye)繪制(zhi)標準(zhun)曲線，根(gen)據讀數可以計算出Vero Cell HCPs蛋(dan)白含量。

§檢(jian)測過(guo)程：取出所有試 劑平衡到室溫→分別移取50µl標準液，對照物和樣品至待測孔→移取100µl anti- Vero Cell:HRP(#F501)至每孔→密封滴定板，搖床室溫溫育2小時，180rpm→清空小孔，用紙吸干殘留液，350µl清洗緩沖液清洗4次→加 100µl TMB 作用物(#F005)→室溫靜置30分鐘，不需搖床→加100µ;l反應終止液(#F006)→分(fen)光光度(du)計450/650nm讀數

§結果分析：標準液(0, 2, 8, 25, 75, 200ng/mL)可用于制作標準曲線，標準液濃度相當于免疫反應HCP總濃度。根據測定的小孔中標準液吸光值繪制標準曲線。數據分析可以使用計算機選配曲線，例如點到點，三次樣本函數，或四參數邏輯曲線。不要使用線性回(hui)歸分析修改樣品(pin)(pin)(pin)吸光(guang)(guang)值(zhi)，這樣會出現(xian)顯著誤差。也可以(yi)(yi)手工(gong)繪圖，Y軸(zhou)標(biao)注吸光(guang)(guang)值(zhi)，X軸(zhou)標(biao)注濃(nong)(nong)度(du)(du)(du)。然后根據(ju)樣品(pin)(pin)(pin)吸光(guang)(guang)值(zhi)計算出樣品(pin)(pin)(pin)中(zhong)HCP濃(nong)(nong)度(du)(du)(du)。（操作(zuo)時每一濃(nong)(nong)度(du)(du)(du)標(biao)準液都要滴定(ding)到兩個小孔中(zhong)，以(yi)(yi)便計算平均分光(guang)(guang)光(guang)(guang)度(du)(du)(du)值(zhi)，樣品(pin)(pin)(pin)也需計算平均吸光(guang)(guang)值(zhi)）。

Vero Cell HCP ELISA組成成份：
● Anti- Vero Cell:HRP(辣根過氧化物酶標記)　          1x12mL   F501(Product#)
● Anti- Vero Cell coated微量滴定板　                       12x8孔　  F502
● Vero Cell HCP標準液(0, 2, 8, 25, 75, 200ng/mL)   1mL/瓶　 F503
● Stop Solution終止液(0.5N硫磺酸)  　　　             1x12mL　 F006
● TMB (3,3’,5,5’-四甲基聯苯氨)　                             1x12mL　 F005
● Wash Concentrate清(qing)洗物(20倍濃縮)　                   1x50mL   F004

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