? 正常情況下，融化后血清的外觀顏色應該是？
血清為動物來源(yuan)，成分(fen)復雜，不同批次(ci)間會存在一些(xie)外觀上的差別。一般情(qing)況(kuang)下，它(ta)們的顏色可能(neng)是金黃色、紅(hong)色、琥(hu)珀棕色或者(zhe)是介(jie)于三者(zhe)之間。

? 血清應如何保存？
未拆封的血清應存放于-15至-20℃，避免反復(fu)凍融。拆封后的血清應無菌(jun)分裝成一次的用(yong)量并存放于-15至-20℃，在產品質量證書(shu)標識的效期內(nei)均可使用(yong)。2-8℃溶(rong)解后建議盡快使用(yong)。

? 血清的有效期是多久？
大部分康寧血清效期是5年，針對每個批次，請通過質檢文件確定具體效期日期。


? 血清應如何融解？
從冰箱中取出(chu)血(xue)清，放于2-8℃融化，融化過程(cheng)中不(bu)時旋轉（swirling mix）混(hun)勻。充分融解(jie)后分裝(zhuang)或平衡到(dao)室溫后使用

? 為什么有時血清中出現絮狀沉淀？是否需要去除？如何去除？
多(duo)種原(yuan)因(yin)可能導致(zhi)絮狀沉淀(dian)的形成，最常見的原(yuan)因(yin)之一(yi)是(shi)融化過程中，脂蛋白聚集所致(zhi)。該現象一(yi)般(ban)不會影響(xiang)產品質(zhi)量。可以(yi)400g離心5分鐘，取上(shang)清(qing)(qing)，然后過濾(lv)。根據需要選擇合(he)適的濾(lv)膜(mo)孔(kong)徑，一(yi)般(ban)的是(shi)0.22um PES材質(zhi)的濾(lv)膜(mo)。為避免濾(lv)膜(mo)阻塞，建議離心后取上(shang)清(qing)(qing)加入培養基(ji)內一(yi)起過濾(lv)而不是(shi)直接(jie)過濾(lv)血清(qing)(qing)。

? 為什么存放于冰箱中的血清會出現沉淀？如何避免該現象？
在(zai)2-8°C條件(jian)下存(cun)放，血(xue)清中(zhong)的(de)(de)(de)(de)(de)多(duo)種蛋(dan)白或脂蛋(dan)白會形成(cheng)肉(rou)眼(yan)可見的(de)(de)(de)(de)(de)沉(chen)淀，如血(xue)纖蛋(dan)白（fibrin），單體時處于溶解狀態(tai)，在(zai)凍融過程中(zhong)會發生聚集，形成(cheng)肉(rou)眼(yan)可見的(de)(de)(de)(de)(de)沉(chen)淀。但該現(xian)象(xiang)一(yi)般不會影響血(xue)清的(de)(de)(de)(de)(de)性能。可以400g離心(xin)5分(fen)鐘，取上清，然后(hou)過濾(lv)(lv)。根據需要選(xuan)擇合(he)適的(de)(de)(de)(de)(de)濾(lv)(lv)膜孔徑(jing)，一(yi)般的(de)(de)(de)(de)(de)是(shi)0.22um PES材質的(de)(de)(de)(de)(de)濾(lv)(lv)膜。為(wei)避免(mian)濾(lv)(lv)膜阻塞，建議(yi)離心(xin)后(hou)取上清加入培養基內一(yi)起過濾(lv)(lv)而不是(shi)直(zhi)接過濾(lv)(lv)血(xue)清。為(wei)盡量避免(mian)出現(xian)上述現(xian)象(xiang)，建議(yi)血(xue)清分(fen)裝成(cheng)一(yi)次(ci)性用(yong)量存(cun)于-15°至-20℃冰箱(xiang)，避免(mian)反復凍融和融化后(hou)的(de)(de)(de)(de)(de)血(xue)清在(zai)2-8°C條件(jian)下長時間放置。

? 血清是否需要做滅活處理？
這取決于您的應用。
滅(mie)活過(guo)程中(zhong)，會導致血(xue)(xue)清(qing)中(zhong)某些成分(fen)被破壞，如(ru)氨基(ji)酸，維(wei)生(sheng)素，生(sheng)長因(yin)子等(deng)。所(suo)以只有在(zai)您的實驗(yan)對(dui)血(xue)(xue)清(qing)有特(te)殊要(yao)求(qiu)時，才會考慮對(dui)血(xue)(xue)清(qing)進行(xing)滅(mie)活處理(li)。如(ru)您的實驗(yan)對(dui)血(xue)(xue)清(qing)中(zhong)的某種組(zu)分(fen)敏感(gan)，需(xu)要(yao)去除該(gai)組(zu)分(fen)。最常見的情況是需(xu)要(yao)去除血(xue)(xue)清(qing)中(zhong)的補體(ti)(ti)蛋(dan)白，因(yin)為補體(ti)(ti)在(zai)機體(ti)(ti)中(zhong)參與(yu)細胞殺傷，巨(ju)噬(shi)細胞和(he)淋巴細胞活化，肥大細胞和(he)血(xue)(xue)小(xiao)板組(zu)胺釋放，平滑肌收縮(suo)等(deng)過(guo)程，所(suo)以一(yi)般在(zai)免疫學相關研究中(zhong)及肌細胞和(he)干細胞的培(pei)養(yang)過(guo)程中(zhong)需(xu)要(yao)對(dui)血(xue)(xue)清(qing)進行(xing)滅(mie)活處理(li)。

? 如何進行血清滅活處理？
血(xue)(xue)清請先按(an)上(shang)(shang)述(shu)“血(xue)(xue)清應如何融解”中的操作步驟(zou)融化(hua)和(he)混勻，熱(re)(re)滅活(huo)時(shi)請將(jiang)血(xue)(xue)清置于56℃水浴30分鐘(zhong)。為盡量(liang)減少(shao)熱(re)(re)滅活(huo)對血(xue)(xue)清品質的影響，一次滅活(huo)的血(xue)(xue)清體積不宜過(guo)大。最(zui)好準備同(tong)(tong)樣的容器裝相等(deng)體積的水（與血(xue)(xue)清相同(tong)(tong)溫(wen)(wen)度），滅活(huo)時(shi)將(jiang)裝有血(xue)(xue)清和(he)水的容器同(tong)(tong)時(shi)放入56℃水浴, 在裝水的容器中放置溫(wen)(wen)度計，加熱(re)(re)過(guo)程中不時(shi)輕輕旋轉混勻血(xue)(xue)清，當溫(wen)(wen)度計顯(xian)示達到56℃左右，開始計時(shi)。56 ℃水浴后，建議馬上(shang)(shang)轉移(yi)到冰上(shang)(shang)降溫(wen)(wen)。

? 為什么需要對血清進行gamma射線輻照？
gamma 射線輻照的目的是滅活血清中的病毒，一般情況下，25-40kGy和30-45kGy是常用的輻射劑量。


? 什么情況下需要無Ca2+/Mg2+離子的PBS？
取決于(yu)您的(de)研(yan)究應用(yong)。除(chu)了一(yi)些(xie)Ca2+/Mg2+會影響實(shi)(shi)驗(yan)結果的(de)實(shi)(shi)驗(yan)以外，一(yi)般在胰(yi)酶(mei)消化前，建(jian)議用(yong)無Ca2+/Mg2+離子的(de)PBS清(qing)洗(xi)細(xi)胞，因為Ca2+/Mg2+會抑制胰(yi)酶(mei)活性。若消化后的(de)貼壁(bi)細(xi)胞需(xu)要(yao)繼(ji)續培養，建(jian)議消化后用(yong)含Ca2+/Mg 2+的(de)PBS清(qing)洗(xi)，因為Ca2+/Mg2+有助于(yu)細(xi)胞的(de)貼壁(bi)過程。另外，若需(xu)要(yao)在緩(huan)沖液(ye)中長時(shi)間保存細(xi)胞，也(ye)推薦使用(yong)含Ca2+/Mg2+的(de)PBS。

? 康寧無Ca2+/Mg2+離子的PBS和DPBS的區別是什么？
取決于您的(de)研究(jiu)應用(yong)。除了(le)一(yi)些Ca2+/Mg2+會影響實驗(yan)結果的(de)實驗(yan)以外，一(yi)般在(zai)胰酶(mei)消(xiao)化前，建議用(yong)無Ca2+/Mg2+離子(zi)的(de)PBS清(qing)洗(xi)細(xi)胞(bao)(bao)，因為Ca2+/Mg2+會抑制胰酶(mei)活性。若(ruo)消(xiao)化后(hou)的(de)貼壁細(xi)胞(bao)(bao)需(xu)要(yao)(yao)繼續(xu)培養，建議消(xiao)化后(hou)用(yong)含Ca2+/Mg2+的(de)PBS清(qing)洗(xi)，因為Ca2+/Mg2+有(you)助(zhu)于細(xi)胞(bao)(bao)的(de)貼壁過程。另外，若(ruo)需(xu)要(yao)(yao)在(zai)緩沖液中長時間(jian)保存(cun)細(xi)胞(bao)(bao)，也(ye)推薦使用(yong)含Ca2+/Mg2+的(de)PBS。

? 康寧是否有注射級別（WFI）的水？
康寧細胞培(pei)養用(yong)水(shui)按(an)照USP和/或(huo)EP 中對注射用(yong)水(shui)（WFI）的(de)無菌(jun)要求進行質控，但康寧的(de)該類產(chan)品為科研用(yong)產(chan)品，非臨床注射用(yong)水(shui)。

? 用于消化的胰酶中加EDTA的原因是什么？
鈣離子會(hui)抑制胰酶(mei)活性(xing)，EDTA作為鈣離子螯合劑(ji)，可以去除鈣離子，有助于胰酶(mei)更好(hao)發揮消(xiao)化細胞的功能

? 為什么在使用胰酶前要先清洗貼壁細胞？
目前(qian)大部分(fen)情況下(xia)，細胞培養液(ye)中(zhong)都含有一定(ding)量血清。血清中(zhong)含有抑制胰酶活性的成分(fen)，如(ru)α1-antitrypsin 和α2-macroglobulin。建議使用無鈣(gai)鎂(mei)離子的緩沖液(ye)清洗細胞。